一、黄连解毒汤对脑缺血小鼠的抗氧化作用研究（论文文献综述）
姜海伟[1]（2021）在《基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究》文中研究说明目的1.通过对缺血性卒中后认知障碍（PSCI）相关“毒邪”进行具体分类,了解各类毒邪的临床分布特征及总体特性,初步分析黄连解毒汤用于PSCI治疗的可行性。2.基于“毒损脑络”理论,通过黄连解毒汤早期干预PSCIND患者,分析其对认知功能、日常生活能力、实验室指标、中医证候评分的疗效作用,并了解PSCI毒邪的动态变化特点。3.通过实验研究探讨黄连解毒汤干预PSCI的应用时机及部分相关机制,并进一步讨论“毒损脑络”理论对于PSCI病机的合理性。方法1.参考大数据分析结果及“SDSVD量表”中的症状要素,对入选的123例PSCI患者,参考“一般病证+严重、秽浊、迁延邪气”原则制定“PSCI中医毒邪症状要素表”并进行“毒邪”分类,并采用“SDSVD量表”进行中医辨证分型,分析各类毒邪与各中医证型、非特异性症状、发病危险因素、实验室检查（CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy）、TOSAT分型、影像学特征（侧支代偿、梗死部位、脑灌注）及认知功能等方面的分布特征及相关性,并从毒邪相兼情况及热性症状存在情况,评价PSCI相关“毒邪”分类方法的临床基础,分析毒邪的共同特性。分布率的比较采用?2检验,相关性分析采用Pearson相关性及Logistic回归分析。2.将60例PSCIND患者随机分为两组,对照组29例行西医基础治疗,治疗组31例加用黄连解毒汤,比较两组治疗前与治疗后1周、1月、3月、6月的MMSE、Mo CA、NIHSS、ADL、中医证候评分,比较两组治疗前与治疗后1周、1月的CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy值,对治疗后1月、6月的疗效进行相关因素分析,总结分析“毒邪”的动态变化特点。计数资料根据方差检验情况行t检验或秩和检验,疗效相关性分析采用二元Logistic回归分析。3.将多发性脑梗死动物模型随机分为5组:假手术组、24h模型对照组、7d模型对照组、24h黄连解毒汤组、7d黄连解毒汤组。给药28天后对比观察其水迷宫检测结果以了解其认知功能,光镜观察梗死及周围区病理,CD34标记MVD,WB法测Notch信号通路Notch1、Jagged2、Hes1、Stat3蛋白及VEGF蛋白含量,ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-β、IL-4、IL-10表达情况。各组之间的比较采用单因素方差（one-way ANOVA）分析。结果1.据“PSCI中医毒邪症状要素表”毒邪分类为热毒、痰毒、瘀毒、腑滞浊毒、正虚蕴毒。经Pearson相关性检验,各中医证型与各毒邪分布具有线性相关。Logistic回归分析发现,热毒与无多次脑梗死、无高血压、有糖尿病、侧支代偿差、CRP升高、嗜睡相关;痰毒与卒中到PSCI时间短、高脂血症、侧支代偿差、NSE升高相关;瘀毒与有高血压、吸烟、饮酒、小血管或前循环大血管病变、D-D及FIB升高有关;腑滞浊毒与侧支代偿差、CRP升高、嗜睡有关;正虚蕴毒与卒中到PSCI时间短、Hcy升高有关。整体毒邪与侧支代偿差、卒中到PSCI时间短、CRP升高、Hcy升高有关。各类“毒邪”相互交织,热象存在率平均达79.60%,提示各类“毒邪”存在共性及整体统一性。2.黄连解毒汤治疗PSCIND,在MMSE及Mo CA评分方面治疗组起效更早,可显着提高ADL评分（p<0.05）。对热毒内盛、痰浊阻络、腑滞浊留、气血不足证候评分可在治疗早期产生更积极作用（p<0.05）,可防阴虚阳亢证进一步加重。治疗组在CRP、NSE、D-D方面的改善作用更明显（p<0.05）。二元Logistic回归分析发现,治疗后1月有效性与采用黄连解毒汤,降低热毒内盛评分及清除热毒相关,同时与CRP、NSE值降低、ADL值降低相关。治疗后6月有效性与采用黄连解毒汤、总体毒邪被清除ADL值降低有关。3.动物实验研究结果,在认知功能行为学方面24h及7d黄连解毒汤组定位航行及空间探索能力优于各模型对照组（p<0.05）,24h黄连解毒汤组优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组梗死及周围区存活细胞密度相对较高。各黄连解毒汤组在大脑皮层Notch1、Jagged2、Hes1、STAT3蛋白及IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10表达改善作用均优于各模型对照组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组在Hes1蛋白、IL-6、IL-4的表达优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。各黄连解毒汤组与对照模型组VEGF表达无明显差异（p>0.05）。24h黄连解毒汤组脑组织MVD显着优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。结论1.对毒邪的分类研究发现,各类毒邪在中医辨证分型、非特异性症状、TOSAT分型、实验室指标、影像学特征方面的分布具有一定的趋向性和相关性。多数毒邪相互交织存在,多数存在热性症状,具有整体统一性,采用黄连解毒汤早期干预PSCI具有可行性。2.采用黄连解毒汤干预PSCICN患者可对患者血CRP、NSE、D-D等及中医证候评分产生积极影响,可改善患者认知功能;黄连解毒汤对其整体毒邪具有清除作用,不单纯局限于热毒。其毒邪动态变化特点进一步反应了毒邪的整体性,也反应了随着病情发展进行“辨证论治”的必要性。3.在缺血性卒中急性期,尽早使用黄连解毒汤可减轻多发性脑梗死动脉模型大鼠的认知功能行为学损害,其部分机制是通过抑制Notch信号通路的激活、调节炎性因子及改善梗死周围区域微循环而实现的。“毒损脑络”理论反应了PSCI的病机特点,也反应了PSCI的“防”与“治”的整体一致性。
李中浩[2]（2021）在《痰热清注射液对脑梗死后apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响》文中进行了进一步梳理背景:中风病与西方医学体系中的脑血管病相似,主要包括脑梗死和脑出血,具有高发病率、高致残率、高死亡率以及高复发率的特点,是临床中常见的神经科急危重症。静脉注射阿替普酶及近些年发展起来的机械取栓能够有效开通闭塞血管,改善患者临床预后。但部分患者由于存在禁忌症、就医不及时等原因未能接受到这些治疗。因此,需要寻找更多更有效的治疗方案。中医治疗中风病已有悠久的历史,改革开放以来形成了中风病诊断和辨证论治标准。随着对中风病认识的不断加深,王永炎院士强调在中风病中应注意毒邪的致病作用,建议在治疗时加入解毒类方药。痰热清注射液由金银花、黄芩、连翘、水牛角和熊胆粉组成,长于清热解毒,在临床上广泛的应用于呼吸系统疾病的治疗。研究人员发现,伴有肺部感染的中风病患者使用痰热清注射液后,不仅咳嗽、发热等症状得到改善,其神经功能的恢复也较快。痰热清注射液的组方思路与安宫牛黄丸、清开灵注射液、醒脑静注射液相似,因此,从毒邪致病的角度推测痰热清注射液解毒开窍的功效,可能对中风病也有一定的治疗作用。一些早期的临床研究也发现,痰热清注射液能够促进脑梗死和脑出血患者的神经功能恢复。目的:探索痰热清注射对中风病的疗效及其治疗机制。方法:1.在临床研究中,我们采用系统评价和荟萃分析的方法,对已发表的关于痰热清注射液治疗中风病的临床文献进行筛选和分析。检索万方、中国知网、中国生物医学文献数据库和PubMed等数据库中截止到2021年1月1日收录的关于痰热清注射液治疗中风病的随机对照临床试验。按照纳入和排除标准筛选出符合要求的文献,进行荟萃分析,同时对文献的偏倚风险进行评价。2.在实验研究中,我们首先采用网络药理学的方法,对痰热清注射液中有效成分治疗中风病的生物学机制进行探索。根据已发表的文献收集痰热清注射液中的已检测到的化合物成分,计算这些化合物的QED值,选择其中大于0.18的做为潜在有效成分。检索PubChem中这些有效成分的药物靶标。将这些靶标与数据库中检索到的已知治疗中风病的药物靶标做交集,得到痰热清注射液治疗中风病的药物靶标。分析这些药物靶标之间的蛋白-蛋白相互作用关系并进行生物学注释。然后,利用大鼠大脑中动脉栓塞法制作脑梗死动物模型,通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色评价不同剂量痰热清注射液对大鼠脑梗死体积的影响。用苏木素-伊红染色和尼氏染色评价梗死模型的病理学特征。最后,使用WB和免疫荧光的方法检测从网络药理学得出的apelin信号通路及其下游的细胞凋亡和自噬相关蛋白的表达。结果:1.系统评价和荟萃分析中共纳入了 11篇文献,涉及955例患者。荟萃分析结果显示,痰热清注射液对降低中风病或伴肺部感染的患者美国国立卫生研究院卒中量表评分均有一定的帮助作用,与对照组相比具有显着的统计学差异（MD=-5.45,95%CI:-10.82～-0.09。MD=-2.37,95%CI:-3.49～-1.26,P<0.05）。对提高患者功能独立性评分（MD=14.90,95%CI:8.84～20.96,P<0.05）、肢体运动功能（MD=7.39,95%CI:2.74～12.04,P<0.05）有一定的帮助作用,且与对照组相比具有显着的统计学差异。虽然对患者日常生活能力评分的提高有一定的帮助作用,但与对照组相比无显着的统计学差异（MD=12.95,95%CI:-1.02～26.92,P<0.05）。纳入研究的存在较高的偏倚风险,且存在较大的异质性。2.在网络药理学研究中,痰热清注射液的81个有效成分共检索到663个药物靶标,在有效成分-药物靶标网络图中,度值最大的有效成分为绿原酸,度值最大的药物靶标为核因子E2相关因子2。其中有116个为治疗中风病的药物靶标。这116个药物靶标蛋白-蛋白相互作用中重要的靶点有白蛋白、细胞肿瘤抗原p53、白细胞介素-8等。生物学功能注释结果显示,这些靶点涉及胆汁分泌、药物代谢、化学致癌、肝病和apelin信号通路等227个通路;脂肪酸合成与代谢、外来化学物质代谢和细胞对药物反应等3258个生物过程;核受体活性、血红素结合反应、丝氨酸型肽酶活性等442个分子功能;排名靠前的有核苷酸活化蛋白激酶复合物、膜筏、突触后膜等222个细胞组分。在脑梗死大鼠模型中,可见梗死部位水肿,空泡形成,细胞死亡。而腹腔注射液低剂量痰热清注射液（2.5ml/kg,每6小时1次）能够明显减少大鼠脑梗死24小时后的梗死体积,与模型组相比具有显着的统计学差异（P<0.05）。WB结果显示,使用痰热清注射液后APJ/PI3K/AKT/mTOR信号通路的蛋白含量与模型组相比显着增加;凋亡相关蛋白BCL2/BAX 比例显着上升,caspase8蛋白含量显着减少;自噬相关蛋白LC3 Ⅱ/LC3Ⅰ比例显着下降;NeuN蛋白含量显着增加,GFAP蛋白含量显着减少。蛋白改变具有显着的统计学差异（P<0.05）。结论:痰热清注射液对中风病特别是脑梗死有一定的治疗作用,其治疗脑梗死的机制可能与激活apelin信号通路,抑制细胞凋亡和自噬等有关。但这些研究较为粗浅,需要更高质量的临床和基础研究来明确痰热清注射液对中风病的临床疗效和药理机制。
张钰坤[3]（2021）在《OX26/ApoE共修饰载黄连解毒汤介孔二氧化硅纳米载体的构建及药效学评价》文中指出中风是当今世界上一种发病率、致死率、致残率都极高的脑血管疾病。其中,中风病例的80%以上为缺血性中风,同时,缺血性中风患者往往会存在一些自发性的再灌注,进而可能引起一系列继发性损伤,例如氧化应激、炎症反应、细胞凋亡、兴奋性氨基酸中毒等。因此,研究缺血性脑卒中的预防与治疗工作具有十分重要的指导意义。中药复方通过多层次、多靶点的治疗方式在中枢神经系统疾病方面已有丰富的知识和经验,黄连解毒汤出自《肘后备急方》,有清热解毒功效,由黄连、黄芩、黄柏、栀子四种中药配伍而成。多项研究表明黄连解毒汤有抗炎、抗菌、抗氧化、抗肿瘤等药理作用,同时可以显着保护脑神经和改善急性脑缺血再灌注损伤。血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）是脑组织和血液之间存在的一种特殊的结构,由脑毛细血管内皮细胞及其紧密连接构成。BBB会限制有毒物质进入中枢神经系统,阻止了绝大部分的分子进入脑部,因此,BBB的存在使得治疗脑部疾病的药物无法入脑发挥更好的治疗作用。介孔二氧化硅作为一种无机纳米载体,因其大的比表面积、可调控的粒径与孔容积、表面易于修饰官能团和多肽、生物安全性高等诸多优点,已被广泛应用于生物医学领域。本文通过构建转铁蛋白受体单克隆抗体（OX26）和载脂蛋白E（ApoE）共修饰的载黄连解毒汤介孔二氧化硅纳米载体（OX26/ApoE-HLJDD-MSN）,以探讨OX26/ApoE-HLJDD-MSN在改善急性脑缺血再灌注损伤方面的保护作用。本文通过改良的水热合成法制备了羧基功能化介孔硅纳米载体,通过碳二亚胺法将OX26/ApoE抗体偶联于表面,采用浸渍法将黄连解毒汤有效部位包载于孔道内,制备成OX26/ApoE-HLJDD-MSN。结果显示,制备的介孔硅载体粒径较小且分散均一,表面羧基官能化带负电使纳米粒子易于被排泄而不引起蓄积毒性。以磷酸盐缓冲液（p H 7.4）与人工脑脊液（Artificial cerebrospinal fluid,ACSF）作为溶出介质考察载黄连解毒汤介孔硅的体外释放行为。结果显示,相比于溶液组与物理混合物组,载黄连解毒汤介孔二氧化硅纳米粒在两种释放介质中均表现出一定的缓释作用。采用小动物活体成像系统,以带有酰肼基团的Cy5染料为荧光探针,尾静脉注射Cy5-溶液、Cy5-MSN、OX26/ApoE-Cy5-MSN考察在BALB/c-nu小鼠体内不同时间的分布情况,以评价OX26/ApoE共修饰介孔二氧化硅体内的脑靶向性。结果显示,在1 h时Cy5溶液在小鼠体内已分布于全身,且随着时间的增加,荧光强度逐渐衰减,24 h基本完全消除;而Cy5-MSN和OX26/ApoE-Cy5-MSN在体内有较长循环,在8 h和24 h时OX26/ApoE-Cy5-MSN在脑部可观察到较明显的荧光,说明OX26和ApoE可以通过受体识别增加药物在大脑聚集浓度,具有一定的脑靶向性。以香豆素6（Cou-6）为荧光探针,代替药物包载于介孔二氧化硅载体中,采用小鼠脑微血管内皮细胞（Mouse brain microvascular endothelial cell line,bEnd.3）作为制剂体外靶向性评价模型,通过CCK-8法评价Cou-6溶液、MSN、OX26/ApoE-MSN对bEnd.3细胞活性的影响,确定最高无毒浓度,进而利用高内涵成像系统观察并记录bEnd.3细胞对Cou-6溶液、Cou-6@MSN及Cou-6@OX26/ApoE-MSN的摄入情况。结果显示,MSN、OX26/ApoE-MSN中Cou-6浓度在0.05μg/m L浓度下对bEnd.3细胞均无毒性,细胞存活率大于80%,以此浓度进行细胞摄取实验,结果显示在给药后2、4、6 h,各组制剂荧光强度随着时间均有所增加,且抗体修饰组荧光强度显着强于溶液组与未修饰组,差异具有显着性（p<0.05）,且同一时间内,bEnd.3细胞对抗体修饰制剂的摄取显着高于其余两组。将大鼠分为模型组（Model）与假手术组（Shame）,通过线栓法阻塞大鼠大脑中动脉,建立脑缺血再灌注损伤模型（MCAO）,尾静脉注射给药HLJDD溶液、HLJDD-MSN、OX26/ApoE-HLJDD-MSN三组制剂,于再灌注24 h后通过Zea Longa法对各组进行行为功能缺损评分;随后处死大鼠取脑组织进行冷冻切片,用TTC染色液（2%）进行染色,拍照并计算脑梗死面积;通过苏木精-伊红染色（HE）对脑组织进行常规组织切片染色,观察海马区细胞形态。结果显示,相较于Model组,三组制剂在一定程度上可降低MCAO模型鼠的神经行为功能缺损、减少脑梗死面积,对MCAO大鼠脑部海马区神经元细胞状态有一定的改善作用,表明所制备的制剂可提高黄连解毒汤对急性脑缺血再灌注损伤的保护作用。综上所述,本实验构建的OX26/ApoE-HLJDD-MSN可以提高药物稳定性,通过受体特异性识别增加药物入脑含量,使药物在脑部聚积发挥作用,对改善急性脑缺血再灌注损伤具有较明显的治疗效果。
于潇,王贵阳,侯宇东,姜艳艳,张薇,刘斌[4]（2021）在《中药抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制的研究进展》文中认为缺血性脑血管病是威胁人类健康与生存的主要疾病之一,发病率高且死亡率高。目前临床上主要的治疗方式是尽早恢复缺血区血液再灌注,使脑组织重新获得血氧供应。然而在恢复血流供应时,常会使缺血组织以及神经系统的病理损害进一步加重,临床症状恶化,造成脑缺血再灌注损伤。脑缺血再灌注损伤的病理过程十分复杂,多种机制参与其中,是目前临床治疗缺血性脑血管病时亟待解决的问题。中药具有多成分、多途径、多靶点的作用特点,对于具有复杂病理机制的脑缺血再灌注损伤具有独特的治疗优势和潜力。以中药药效物质及其作用机制与靶点为切入点,对近10年来发现的具有抗脑缺血再灌注损伤作用的中药研究进行综述,以期为抗脑缺血再灌注损伤治疗药物的进一步科学开发和应用提供参考。
张婷,宋厚盼,林也,刘乐平,戴宗顺,陈小娟,唐琳,陆晓珊,廖菁,蔡雄,刘中秋[5]（2020）在《黄连解毒汤之“清热解毒”药效与作用机制研究进展》文中认为目的从现代药理学角度阐述了黄连解毒汤功效的药性理论及其作用机制。方法通过查阅Pubmed及中国期刊全文数据库（CNKI）,就近年来黄连解毒汤功效及药理相关文献的分析,对黄连解毒汤"清热解毒"的功效展开药理作用进展汇总。结果与黄连解毒汤"清热解毒"的功效相关的药效主要有抗炎、抗菌、抗氧化、降血糖、降血脂、降血压、抗肿瘤及免疫调节、调节肠道菌群、改善脑缺血、保护心肌以及胃肠黏膜等。结论黄连解毒汤"清热解毒"功效涵盖多种现代药理学作用,可为完善黄连解毒汤的中药药性理论提供现代科学依据。
彭红梅[6]（2020）在《黄连解毒汤含药脑脊液对Aβ1-42致BV2细胞凋亡及炎症反应的机制研究》文中研究说明目的:探讨黄连解毒汤含药脑脊液对寡聚体Aβ1-42诱导的BV2细胞凋亡与炎症反应的影响及其作用机制。方法:利用寡聚体Aβ1-42诱导BV2细胞,复制细胞损伤模型。将处于对数期的BV2细胞随机分为空白对照组,Aβ模型组,石杉碱甲含药脑脊液组、黄连解毒汤含药脑脊液低、中、高剂量组,分别加入10%空白脑脊液,10%空白脑脊液,10%石杉碱甲含药脑脊液,5%、10%、20%黄连解毒汤含药脑脊液;除空白组外,其余各组加入终浓度为10μM寡聚体Aβ1-42,复制小胶质细胞凋亡模型。采用流式细胞术检测各组BV2细胞凋亡情况;Elisa法检测BV2细胞上清液中IL-10、IL-6、IFN‐γ表达水平;Western blot法检测BV2细胞Arg-1与i NOS蛋白表达水平。结果:1.与空白对照组比较,Aβ模型组BV2细胞凋亡率明显增加（*P<0.05）,细胞上清液中IL-10显着降低（*P<0.01）,IL-6、IFN‐γ水平明显升高（*P<0.05）。2.黄连解毒汤含药脑脊液能够降低寡聚体Aβ1-42诱导BV2细胞凋亡。3.黄连解毒汤含药脑脊液能够升高BV2细胞上清液中抗炎因子IL-10（*P<0.05）,降低促炎因子IL-6、IFN‐γ水平（*P<0.05）。4.黄连解毒汤含药脑脊液能够上调BV2细胞中Arg-1蛋白表达水平,下调i NOS于Cleaved Caspase-3蛋白表达水平（*P<0.05）。结论:1.寡聚体Aβ1-42能够诱导BV2细胞凋亡,抑制BV2细胞M2型激活,促进BV2细胞促炎M1型激活,释放IL-6、IFN‐γ等促炎因子。2.黄连解毒汤含药脑脊液能够改善寡聚体Aβ1-42诱导的小胶质细胞炎性因子释放,其作用机制可能与黄连解毒汤含药脑脊液能够保护小胶质细胞,减少小胶质细胞凋亡,从而减少IFN‐γ合成,促进抗炎因子IL-10释放,促进BV2细胞M2型激活,减少促炎M1型激活,降低IL-6表达水平有关。
李泽惠[7]（2020）在《参麻益智方调控星形胶质细胞改善VaD大鼠认知功能研究》文中研究指明研究背景:血管性痴呆（vascular dementia,VaD）是指在缺血性、出血性及急慢性缺血缺氧性脑血管疾病引起的脑组织损害基础上产生的以高级神经认知功能障碍为主的一组临床综合征,是患病率仅次于阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的第二常见痴呆类型。VaD发病率随年龄增长,故在人口老龄化趋势下正逐渐成为社会主要健康问题之一。VaD的病理标准尚缺乏明确的共识,其发病机制与氧化应激损伤、神经炎症、脑能量代谢障碍、胆碱能系统失调等有关。尽管在该领域进行了大量的研究工作,但目前可用的治疗方法也只是对症治疗,可在短期内减轻一些认知功能症状,但几乎不能减缓疾病的进展。而中医药具有多靶点、多途径的作用机制,在增强记忆力、控制与痴呆相关的精神和行为症状方面有较多经验,在VaD治疗上也逐步显示出优势。星形胶质细胞（astrocyte,AS）在脑内广泛分布,具有结构支持、信息传递、代谢平衡维持、脑血流量调节等众多功能;神经系统的损伤和病变,都可以使AS表现出形态、功能以及基因表达的反应性改变。越来越多证据显示反应性AS增生也是复杂、多面性的过程,因此,研究VaD模型的AS类型及特化生物学功能,对于AS在VaD疾病过程中可能获得或失去的功能进行探讨,对于阐明VaD的发生、发展及治疗有着十分重要的意义。参麻益智方由人参、天麻、鬼箭羽、川芎组成,具有补虚益智,化瘀通络的功效,是周文泉教授治疗气虚血瘀型血管性痴呆的经验方,对于VaD的早期预防和干预治疗效果显着。本研究在前期研究的基础上,通过观察参麻益智方对AS及其功能的调控作用,以明确其改善VaD大鼠认知功能的机制,为临床应用提供参考依据。目的:观察参麻益智方对血管性痴呆模型大鼠认知功能和星形胶质细胞的影响,并阐明其调控机制。方法:采用微球栓塞法建立VaD大鼠模型,随机分为假手术（Sham）组、微球栓塞模型（ME）组、参麻益智方低剂量（ME+SL）组和参麻益智方高剂量（ME+SH）组,灌胃给药2周。通过Morris水迷宫实验评价大鼠的空间学习记忆能力;免疫荧光法标记脑组织切片NeuN、GFAP并进行阳性细胞（神经元、星形胶质细胞）计数;抗体芯片筛选模型差异神经相关蛋白表达;ELISA检测促炎因子IL-1β和TNF-α的含量;Western blot检测VEGF、HIF-1α的表达情况;qPCR检测Nrf2、HO-1 的 mRNA 水平。结果:1.Morris水迷宫实验结果显示:与Sham组相比,ME组大鼠的逃避潜伏期明显延长（P<0.05）,穿越平台次数明显减少（P<0.05）,目标象限停留时间明显缩短（P<0.05）,提示ME大鼠有空间学习记忆能力的损伤;ME+SH组逃避潜伏期较ME组明显缩短（P<0.05）,ME+SL组和ME+SH组穿越平台次数较ME组明显增多（P<0.05）,ME+SL组和ME+SH组原平台象限停留时间较ME组明显延长（P<0.05）,提示参麻益智方能够改善VaD大鼠的空间学习记忆能力。2.NeuN免疫荧光结果显示:ME组海马CA1区NeuN阳性细胞数量较Sham组明显减少（P<0.05）,提示ME大鼠的海马CA1区神经元受到损伤而丢失;ME+SH组的NeuN 阳性细胞数量较ME组明显增多（P<0.05）,提示参麻益智方能够减少海马CA1区神经元的丢失。3.GFAP免疫荧光结果显示:ME组海马CA1区GFAP阳性细胞数量较Sham组明显增多（P<0.05）,ME+SH组GFAP阳性细胞数量较ME组明显增多（P<0.05）。4.抗体芯片对神经相关蛋白筛选结果显示:ME组TNF-α、IL-1β、IFNγ、VEGFA水平较Sham组明显升高（P<0.05）。5.ELISA结果显示:ME组IL-1β、TNF-α含量较Sham组明显升高（P<0.05）;ME+SL、ME+SH 组 IL-1β、TNF-α 含量均较 ME 组明显降低（P<0.05）。6.Western blot结果显示:ME组VEGF表达较Sham组明显升高（P<0.05）,ME+SH组VEGF表达较ME组明显升高（P<0.05）。ME组HIF-1α表达较Sham组明显升高（P<0.05）,ME+SL、ME+SH组HIF-1α表达较ME组明显升高（P<0.05）。7.qPCR结果显示:ME组HO-1、Nrf2 mRNA水平较Sham组明显升高（P<0.05）;ME+SL、ME+SH 组 HO-1、Nrf2 mRNA 水平较 ME 组明显升高（P<0.05）。结论:参麻益智方可能通过上调Nrf2/HO-1通路,促进星形胶质细胞产生具有保护作用的反应性增生,一方面抑制促炎因子IL-1β、TNF-α的表达减少神经损伤,另一方面通过上调HIF-1α促进神经营养因子VEGF的分泌,发挥神经保护、改善认知功能的作用。
曹东敏[8]（2020）在《黄连解毒汤体内外化学成分分析及其干预糖尿病脑病的代谢组学研究》文中进行了进一步梳理黄连解毒汤是清热解毒方中的经典名方,首次记载于《肘后备急方》,主治实热火毒、三焦热盛之症。此方由黄连、黄芩、黄柏、栀子四味药按照3:2:2:3组成。近年来,针对黄连解毒汤的化学成分分析不断深入,但主要是对其单个或几个成分进行分析。因此,需要建立可靠的分析手段对黄连解毒汤进行分析。现代药理研究表明黄连解毒汤对糖尿病脑病具有良好的效果,但体内的药效物质及作用机制尚不清楚。因此,本论文针对上述问题,对黄连解毒汤进行了体内外化学成分分析、糖尿病脑病的药效研究以及代谢组学分析,以探讨黄连解毒汤干预糖尿病脑病的可能作用机制。详细研究内容与结果如下:1.黄连解毒汤体外化学成分分析采用UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS的数据采集技术结合自建黄连解毒汤数据库对黄连解毒汤的体外化学成分进行鉴定。本章节首先建立黄连解毒汤化学成分数据库:通过对四味组方药材的化学成分进行大量文献调研,并对各个化合物的结构式、分子式、分子量、来源归属等信息进行整理汇总;然后,通过总结不同结构类型的化合物的质谱裂解规律结合对照品比对、Compoud Discover软件解析和参考文献的方法,从黄连解毒汤中一共鉴定138个化合物,包括39个生物碱,29个黄酮,15个环烯醚萜,5个单萜,36个有机酸酯和12个其他类化合物,并将化合物归属到单味药材中,为黄连解毒汤体内成分分析提供数据支撑。2.黄连解毒汤体内入血成分分析在体外研究的基础上,本实验采用UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS技术对黄连解毒汤入血成分分析及在各组织器官中的分布。体内原型成分的鉴定:通过扣除空白生物样本中基质峰,给药大鼠的生物样品对比复方提取液质谱信息确定原型成分的色谱峰,并结合对照品比对和体外成分数据库,在大鼠体内发现31个原型成分,包括12个生物碱,13个黄酮,6个环烯醚萜。本部分发现生物碱类成分主要分布在肾脏和肝脏,并且大部分生物碱都在大鼠脑中存在;黄酮类成分主要分布于在肝脏和在心脏中;环烯醚萜类成分在机体的各个组织中均有分布。3.黄连解毒汤干预糖尿病脑病的药效学评价本研究通过db/db小鼠建立糖尿病脑病模型,通过Morris水迷宫实验、组织病理学及脑组织中的SOD、GSH、Ach和MDA水平等结果,发现黄连解毒汤水提液给药后能够改善糖尿病脑病小鼠海马区神经元细胞的损伤,减少海马区神经细胞凋亡,缓解脑部氧化应激损伤,显着改善小鼠的学习和记忆能力。4.黄连解毒汤干预糖尿病脑病的代谢组学研究本章节建立基于UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS技术的药物代谢组学方法,并研究黄连解毒汤对糖尿病脑病小鼠血浆代谢物的影响。多元统计分析结果表明各组之间的血浆代谢物存在显着性差异,并鉴定出21个潜在生物标志物,主要以不饱和脂肪酸、溶血磷脂酰胆碱为主,涉及长链脂肪酸的β氧化、亚油酸代谢和谷胱甘肽代谢。因此,黄连解毒汤可能通过调节糖脂代谢紊乱、改善氧化应激和炎症损伤等多途径发挥干预糖尿病脑病的作用。综上所述,本论文建立了黄连解毒汤体内外成分分析方法,系统阐明了黄连解毒汤的化学物质基础,总结了黄连解毒汤体内不同类型成分在各器官的特异性分布,揭示了黄连解毒汤可能通过调节糖脂代谢紊乱、改善氧化应激和炎症损伤等多途径发挥干预糖尿病脑病的作用。
刘旺华[9]（2019）在《基于微观辨证探讨脑缺血后脾虚病机可能及健脾补土方干预》文中研究表明目的:采用文献调查法探讨脑缺血损伤后脾虚病机可能;从在体和离体两层次探讨健脾补土方（JPBTF）对脑缺血损伤的保护作用及其对细胞外基质（ECM）及整合素（INT）-黏着斑激酶（FAK）信号通路的干预作用及机理,反证脑缺血损伤后脾虚病机可能,为临床抗脑缺血损伤提供新的治法和切入点。方法:1.通过文献回顾性研究,检索近10年脑卒中急性期相关期刊文献,运用频次分析探讨缺血性脑卒中证素分布规律。2.以《古今名医临证金鉴·中风卷》收录的着名医家治疗脑卒中的经验方为研究对象,运用频次分析、聚类分析探讨缺血性脑卒中用药规律。3.基于微观辨证和取象比类思想,将神经ECM微观结构与中医“脾土”功能之间的相似性进行类比,提出健脾补土法保护ECM抗脑缺血损伤的治法。在体实验中,采用大脑中动脉闭塞法制备大鼠脑缺血再灌注模型。将大鼠分为假手术组、模型组、阳性对照组、JPBTF小剂量组、JPBTF中剂量组、JPBTF大剂量组。神经功能缺损评分采用改良大鼠m-NSS法,脑组织病理形态采用HE染色法观察,血脑屏障采用电镜观察,血脑屏障通透性采用伊文思蓝渗出法检测,细胞外基质胶原（Col Ⅳ）、层粘连蛋白（LN）、纤维蛋白原（FN）、Caspase-3蛋白表达用免疫组化法检测,胶原容积分数（CVF）采用Masson染色法检测,MMP-9 mRNA、MMP-2 mRNA表达用RT-PCR法检测,INTβ3、p-FAK、p-AKT、bcl-2蛋白表达用免疫印迹法检测,神经细胞凋亡检测用TUNEL法。细胞实验中INT、ILK、FAK蛋白表达采用免疫印迹法和免疫细胞化学法检测。结果:1.脑卒中急性期常见证型有13个证型,其中与“痰”有关的证有7个,累积频率占53.8%。与“瘀,”有关的证型有5个,累积频率占50.2%。与“气虚”有关的证型有3个,累积频率占22.9%。2.脑卒中急性期病位证素频次排前3的分别是脑、脾、肝;病性证素频次排前3的分别是痰、瘀血、气虚。3.脑卒中处方中频次排前10的单味药是白芍、牛膝、当归、半夏、茯苓、石菖蒲、胆南星、钩藤、黄芪、熟地。4.脑卒中处方中频次排前5位的药类依次是补虚药、平肝熄风药、活血化瘀药、清热药、化痰药。5.高频使用药物聚类分析聚为6类:分别是涤痰汤加减、羚角钩藤汤加减、天麻枸杞菊花饮、镇肝熄风汤加减、六味地黄丸加减、补阳还五汤加减。6JPBTF各剂量能改善脑缺血再灌注大鼠模型神经功能症状（P<0.01）,改善脑组织病理形态;JPBTF大、中剂量能保护血脑屏障完整性,减轻血脑屏障通透性,减少脑组织伊文思蓝的渗出（P<0.05）;JPBTF各剂量能减轻神经细胞凋亡（P<0.05～0.01）;JPBTF大、中剂量能减轻脑组织Col Ⅳ、LN、FN的降解和丢失（P<0.05～0.01）;JPBTF各剂量能抑制ECM降解酶MMP-9、MMP-2的表达（P<0.05～0.01）;JPBTF大、中剂量促进INT-FAK信号通路关键蛋白INTβ3、ILK、p-FAK、p-AKT、bcl-2 的表达（P<0.05～0.01）;JPBTF 各剂量能降低脑组织 Caspase-3的表达（P<0.05～0.01）。结论:1.文献研究显示,病位证素除了脑,脾排在第一,病性证素痰排第一,气虚排第三。表明脾失健运,气血生化不足以及脾失健运,酿湿生痰是缺血性脑卒中的重要病理环节,脾虚是脑缺血后的一个重要的病机;通过对《当代名医临证金鉴·中风卷》进行数据挖掘显示,健脾益气是治疗脑卒中的重要治法单元,为健脾补土法组方治疗脑卒中提供了理论支撑。2.健脾补土方能改善脑缺血再灌注大鼠脾虚状态、神经功能和脑组织病理形态,减轻ECM降解,抑制神经细胞失巢凋亡。3.健脾补土方可能通过保护ECM和干预INT-FAK信号通路减轻脑缺血神经损伤。4.基于微观辨证和取象比类思想将ECM与“脾土”类比建立的健脾补土法保护神经ECM抗脑缺血损伤具有可行性。
王文杰,陈赛贞,徐红燕,徐煜彬,陈桂荣[10]（2018）在《黄连解毒汤抗脑缺血研究进展及展望》文中进行了进一步梳理中医认为络脉瘀阻会化生火毒,损伤脑络从而造成中风等脑血管疾病康复困难,解毒通络则是中风病治疗的核心环节。黄连解毒汤具有抗炎、抗氧化、抗菌以抗脑缺血等作用,近年来,在"毒损脑髓、脑络"的中医理论观点指导下,黄连解毒汤已被广泛应用于治疗脑血管疾病。本文主要从黄连解毒汤用于抗脑缺血的临床研究和实验研究两方面进行综述。黄连解毒汤抗脑缺血主要与抗炎、抗氧化以及改善血流和能量代谢作用相关。
二、黄连解毒汤对脑缺血小鼠的抗氧化作用研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、黄连解毒汤对脑缺血小鼠的抗氧化作用研究（论文提纲范文）
（1）基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分:对PSCI相关中医“毒邪”分类的研究 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.观察指标及研究方法 |
| 4.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.入选患者中医证型及有关实验室指标的总体分布情况 |
| 2.各中医证型与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 3.毒邪的分类与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 4. 各中医证型与相应毒邪的分布特征及相关性 |
| 5. 各类毒邪相兼情况分布特征 |
| 6. 各类毒邪中热性症状存在情况 |
| 7. 各类毒邪与所观察要素的相关性分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的中医证候学研究 |
| 2.对PSCI毒邪的分类定义 |
| 3.对PSCI中医证型及毒邪分类研究结果的解读及探讨 |
| 4.对于“素毒”与“新毒”的理解 |
| 5.PSCI毒邪的整体统一性及黄连解毒汤治疗的可行性 |
| 6.本研究需要进一步延伸的方向 |
| 第二部分:早期应用黄连解毒汤对PSCIND患者的疗效观察 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.分组情况及治疗方法 |
| 4.观察指标及研究方法 |
| 5.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.黄连解毒汤对认知功能MMSE评分的影响 |
| 2.黄连解毒汤对认知功能MoCA评分的影响 |
| 3.黄连解毒汤对神经功能NIHSS评分的影响 |
| 4.黄连解毒汤对日常生活能力ADL评分的影响 |
| 5.黄连解毒汤对各中医证候评分的影响 |
| 6.黄连解毒汤对实验室指标的影响 |
| 7.对治疗后1 月、6 月疗效的相关因素分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的治疗与“毒损脑络”学说 |
| 2.黄连解毒汤在脑血管病中的应用 |
| 3.导师组有关黄连解毒汤在认知障碍方面的研究基础 |
| 4.对神经、认知功能及ADL评分的影响作用分析 |
| 5.对各中医证候评分及有关毒邪的动态影响作用分析 |
| 6.对相关实验室指标的影响作用分析 |
| 7.本研究的意义及仍需解决的问题 |
| 第三部分:黄连解毒汤对脑梗死动物模型认知功能影响的实验研究 |
| 引言 |
| 实验动物与方法 |
| 1.实验动物 |
| 2.试剂及仪器 |
| 3.多发性脑梗死大鼠动物模型的制作 |
| 4.随机分组及给药 |
| 5.大鼠脑组织取材 |
| 6.指标检测及方法 |
| 7.统计学方法 |
| 结果 |
| 1. 各组大鼠的行为学认知功能检测 |
| 2. 各组大鼠皮层组织 HE 染色病理检查 |
| 3. 各组大鼠脑组织梗死周围区 MVD 检测 |
| 4.各组大鼠脑皮层组织Notch信号通路及VEGF蛋白检测 |
| 5.各组大鼠脑皮层组织炎性相关因子的检测 |
| 讨论 |
| 1.对PSCI发生机制的认识及所观察指标的选择 |
| 2.黄连解毒汤对于脑缺血及PSCI影响的可能机制 |
| 3.对PSCI相关信号通路的选择 |
| 4.动物造模方法的选择 |
| 5.对实验分组方法的选择 |
| 6.对实验结果的解读及分析 |
| 7.本研究的意义及有待延伸的方向 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录1 文献综述:“毒损脑络”学说与卒中后认知障碍 |
| 参考文献 |
| 附录2 血管性痴呆中医证候诊断量表(SDSVD) |
| 附录3 PSCI中医毒邪症状要素表 |
| 附录4 蒙特利尔认知评估量表(MoCA) |
| 附录5 简易智能精神状态检查量表(MMSE) |
| 附录6 日常生活能力(ADL)评分量表 |
| 附录7 大鼠改良神经功能缺损评分(mNSS) |
| 附录8 各组实验动物水迷宫活动轨迹图例 |
| 附录9 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区 HE 染色病理结果 |
| 附录10 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区微血管密度情况 |
| 在校期间发表的论文 |
| 在读期间参与的科研项目 |
| 致谢 |
（2）痰热清注射液对脑梗死后apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 从毒论治中风病的研究进展 |
| 一、中风病中西医论治现状 |
| 二、从毒论治中风病的理论基础 |
| 三、解毒法治疗中风病的当代实践 |
| 四、常用解毒类方药治疗中风病的现代研宄 |
| 五、总结和展望 |
| 六、参考文献 |
| 综述二 痰热清注射液成分、治疗机制及临床应用的研究进展 |
| 一、痰热清注射液出自名家，历经考验，疗效确切 |
| 二、痰热清注射液含有多种化学成分 |
| 三、痰热清注射液的药理作用及安全性研究进展 |
| 四、痰热清注射液的临床应用进展 |
| 五、痰热清注射液从解毒切入治疗中风的研宄现状和展望 |
| 六、参考文献 |
| 前言 |
| 临床研究 |
| 痰热清注射液治疗中风病的系统评价和荟萃分析 |
| 1 引言 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4. 讨论 |
| 实验研究 |
| 研究一 利用网络药理学探讨痰热清注射液治疗中风病的生物学机制 |
| 1 引言 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 研究二 不同剂量痰热清注射液对大鼠脑梗死体积的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 研究三 痰热清注射液对apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 存在的问题与不足 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）OX26/ApoE共修饰载黄连解毒汤介孔二氧化硅纳米载体的构建及药效学评价（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 OX26/ApoE-HLJDD-MSN的制备及表征 |
| 1.实验仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试药 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 介孔二氧化硅载体制剂的制备 |
| 2.2 介孔二氧化硅载体制剂的表征 |
| 2.3 黄连解毒汤有效成分含量测定分析方法的建立 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 电位、粒径与粒径分布 |
| 3.2 透射电子显微镜图 |
| 3.3 物理吸附 |
| 3.4 X射线衍射 |
| 3.5 差示扫描量热分析 |
| 3.6 热重分析 |
| 3.7 黄连解毒汤有效成分含量测定分析方法的建立 |
| 3.8 载药量的测定 |
| 4.讨论 |
| 5.本章小结 |
| 第二章 体外释放分析方法的建立及体外释放度的研究 |
| 1.实验仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试药 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 体外释放介质的配制 |
| 2.2 体外释放含量测定方法的建立 |
| 2.3 体外释放度研究 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 专属性考察 |
| 3.2 标准曲线的绘制 |
| 3.3 精密度考察 |
| 3.4 稳定性试验 |
| 3.5 溶解度考察 |
| 3.6 体外释放结果 |
| 4.讨论 |
| 5.本章小结 |
| 第三章 活体成像系统检测OX26/ApoE-MSN在裸鼠体内的分布 |
| 1.实验仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试药 |
| 1.3 实验动物 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 Cy5溶液的制备 |
| 2.2 Cy5-MSN的制备 |
| 2.3 OX26/ApoE-Cy5-MSN的制备 |
| 2.4 制剂中Cy5的含量测定 |
| 2.5 小动物活体成像实验 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 标准曲线的绘制 |
| 3.2 制剂中Cy5含量的测定 |
| 3.3 小鼠活体成像实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.本章小结 |
| 第四章 bEnd.3细胞对Cou-6@OX26/ApoE-MSN的摄入研究 |
| 1.实验仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试药 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 香豆素6 制剂的制备 |
| 2.2 溶液配制 |
| 2.3 bEnd.3对Cou-6@OX26/ApoE-MSN的摄入研究 |
| 2.4 统计学处理 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 Cou-6含量测定 |
| 3.2 细胞毒性 |
| 3.3 bEnd.3对Cou-6@OX26/ApoE-MSN的摄入研究 |
| 4.讨论 |
| 5.本章小结 |
| 第五章 OX26/ApoE-HLJDD-MSN初步药效学评价 |
| 1.实验仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试药 |
| 1.3 动物 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 制剂的制备 |
| 2.2 动物分组及给药 |
| 2.3 体外溶血试验 |
| 2.4 脑缺血再灌注模型的制备 |
| 2.5 指标检测 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 体外溶血实验 |
| 3.2 神经功能缺损评分 |
| 3.3 脑梗死面积评价 |
| 3.4 常规组织切片染色评价 |
| 4.讨论 |
| 5.本章小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 综述 刺激响应型介孔二氧化硅新型给药系统治疗癌症的新策略 |
| 1.刺激响应型介孔二氧化硅的分类 |
| 1.1 内源性刺激-响应介孔二氧化硅 |
| 1.2 外部刺激-响应型介孔二氧化硅 |
| 2.癌症治疗的靶向性选择策略 |
| 2.1 被动靶向治疗策略 |
| 2.2 主动靶向治疗策略 |
| 3.介孔二氧化硅新型药物递送系统面临的挑战 |
| 4.结论与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）中药抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制的研究进展（论文提纲范文）
| 1 治疗CIRI的单味中药 |
| 1.1 天麻 |
| 1.2 当归 |
| 1.3 大黄 |
| 1.4 雷公藤 |
| 2 治疗CIRI的中药药对 |
| 2.1 丹参-红花药对 |
| 2.2 乳香-没药药对 |
| 2.3 黄芪-红花药对 |
| 2.4 当归川芎药对 |
| 3 治疗CIRI的中药复方 |
| 3.1 补阳还五汤 |
| 3.2 黄连解毒汤 |
| 3.3 地黄饮子 |
| 3.4 通心络胶囊 |
| 4 结语与展望 |
（5）黄连解毒汤之“清热解毒”药效与作用机制研究进展（论文提纲范文）
| 1 抗炎作用 |
| 2 抗菌作用 |
| 3 抗氧化作用 |
| 4 降血糖作用 |
| 5 降血脂作用 |
| 6 降血压作用 |
| 7 抗肿瘤及免疫调节作用 |
| 8 调节肠道菌群作用 |
| 9 改善脑缺血 |
| 10 保护心肌 |
| 11 保护胃肠黏膜 |
| 12 讨论 |
（6）黄连解毒汤含药脑脊液对Aβ1-42致BV2细胞凋亡及炎症反应的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词对照表 |
| 前言 |
| 1 阿尔茨海默病概述 |
| 1.1 阿尔茨海默病发病机制假说 |
| 1.2 Aβ沉积与阿尔茨海默病 |
| 1.3 小胶质细胞与阿尔茨海默病 |
| 1.3.1 小胶质细胞对脑稳态的保护作用 |
| 1.3.2 小胶质细胞通过表面受体响应吞噬功能 |
| 1.3.3 小胶质细胞过度激活与凋亡促进神经炎症 |
| 2 中医对阿尔茨海默病的认识 |
| 3 阿尔茨海默病治疗现状 |
| 3.1 胆碱酯酶抑制剂 |
| 3.2 抑制Aβ蛋白沉积药物 |
| 3.3 N-甲基-D-天门冬氨酸受体拮抗剂 |
| 3.4 钙离子拮抗剂 |
| 3.5 抗氧化药物 |
| 3.6 非甾体抗炎药物 |
| 3.7 靶向小胶质细胞治疗 |
| 4 黄连解毒汤治疗阿尔茨海默病的研究基础 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物与细胞 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器及耗材 |
| 1.5 实验试剂配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 寡聚体Aβ_(1-42)淀粉样蛋白孵育 |
| 2.2 黄连解毒汤含药脑脊液脑脊液制备 |
| 2.2.1 动物分组与给药 |
| 2.2.2 制备含药脑脊液 |
| 2.3 小胶质细胞培养 |
| 2.3.1 细胞换液 |
| 2.3.2 细胞传代 |
| 2.3.3 细胞冻存 |
| 2.3.4 细胞复苏 |
| 2.4 实验检测 |
| 2.4.1 MTT法测定不同浓度寡聚体Aβ_(1-42)致BV2 细胞损伤的影响 |
| 2.4.2 Annexin V-FITC/PI双染法检测小胶质细胞凋亡 |
| 2.4.2.1 寡聚体Aβ_(1-42)诱导小胶质细胞凋亡浓度确定 |
| 2.4.2.2 流式细胞术检测黄连解毒汤对寡聚体Aβ_(1-42)致小胶质细胞凋亡率影响 |
| 2.4.3 Western Blot检测黄连解毒汤对寡聚体Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞Cleave Caspase-3、Arg-1与i NOS蛋白表达水平影响 |
| 2.4.3.1 小胶质细胞蛋白提取 |
| 2.4.3.2 BCA蛋白定量检测与蛋白变性 |
| 2.4.3.3 Western blot免疫印迹法检BV2 细胞Cleave Caspase-3、Arg-1与i NOS蛋白的表达 |
| 2.4.4 黄连解毒汤含药脑脊液对寡聚体Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞炎性因子IFN-γ、IL-6、IL-10 表达的影响 |
| 3 统计学分析方法 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 不同浓度寡聚体Aβ_(1-42)作用于BV2细胞毒性作用观察 |
| 4.2 黄连解毒汤含药脑脊液对Aβ_(1-42)致BV2细胞凋亡的影响 |
| 4.2.1 寡聚体Aβ_(1-42)诱导小胶质细胞凋亡浓度确定 |
| 4.2.2 黄连解毒汤对寡聚体Aβ_(1-42)致小胶质细胞凋亡影响 |
| 4.3 黄连解毒汤对寡聚体Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞Cleaved Caspase-3、Arg-1与i NOS蛋白表达水平影响 |
| 4.4 黄连解毒汤含药脑脊液对寡聚体Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞炎性因子IFN-γ、IL-6、IL-10表达的影响 |
| 讨论 |
| 1 AΒ沉积与细胞凋亡 |
| 1.1 细胞凋亡与AD |
| 1.2 Aβ诱导细胞凋亡 |
| 2 神经炎症是阿尔茨海默病的重要发病机制 |
| 3 小胶质细胞凋亡加重AΒ沉积与神经炎症 |
| 4 黄连解毒汤可以通过抑制小胶质细胞凋亡调控小胶质细胞极化改善神经炎症 |
| 5 “毒损脑络”理论与黄连解毒汤在AD中的运用 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 从“毒损脑络”探讨小胶质细胞在阿尔茨海默病发病中的作用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专着、及科研成果 |
（7）参麻益智方调控星形胶质细胞改善VaD大鼠认知功能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一: 星形胶质细胞与脑缺血损伤修复的研究进展 |
| 综述二: 中药调控星形胶质细胞治疗血管性认知功能障碍的研究进展 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一: 参麻益智方对VaD大鼠认知功能和神经元损伤的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 参麻益智方对VaD大鼠学习记忆能力的影响 |
| 3.2 参麻益智方对VaD大鼠神经元的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 实验二: 参麻益智方对VaD大鼠反应性星形胶质细胞的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 实验三: 参麻益智方调控星形胶质细胞的机制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 VaD大鼠神经相关差异蛋白筛选 |
| 3.2 参麻益智方对IL-1β、TNF-α的影响 |
| 3.3 参麻益智方对HIF-1α、VEGF的影响 |
| 3.4 参麻益智方对Nrf2、HO-1的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结语 |
| 1 结论 |
| 2 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（8）黄连解毒汤体内外化学成分分析及其干预糖尿病脑病的代谢组学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1.1 黄连解毒汤化学成分研究进展 |
| 1.1.1 生物碱 |
| 1.1.2 黄酮 |
| 1.1.3 萜类 |
| 1.2 黄连解毒汤的主要有效成分的药理作用研究概述 |
| 1.2.1 抗肿瘤 |
| 1.2.2 保肝作用 |
| 1.2.3 调脂降糖作用 |
| 1.2.4 黄连解毒汤与中枢系统疾病的研究 |
| 1.3 糖尿病脑病的认识 |
| 1.4 研究内容和意义 |
| 第二章 黄连解毒汤体外化学成分分析 |
| 2.1 仪器与材料 |
| 2.2 实验内容 |
| 2.2.1 供试品的制备 |
| 2.2.2 对照品溶液的制备 |
| 2.2.3 色谱条件及UHPLC-Q-ORBITRAP HRMS质谱条件 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 生物碱类化合物的质谱裂解规律 |
| 2.3.2 黄酮类化合物的质谱裂解规律 |
| 2.3.3 环烯醚萜类化合物的质谱裂解规律 |
| 2.3.4 其他萜类化合物的质谱裂解规律 |
| 2.3.5 有机酸酯类化合物的质谱裂解规律 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 黄连解毒汤体内化学成分分析 |
| 3.1 仪器与材料 |
| 3.2 动物 |
| 3.3 实验内容 |
| 3.3.1 体外样品制备 |
| 3.3.2 生物样品的采集 |
| 3.3.3 生物样品的制备 |
| 3.3.4 色谱条件 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 环烯醚萜类成分体内成分分析 |
| 3.4.2 生物碱类化合物体内成分分析 |
| 3.4.3 黄酮类化合物体内成分分析 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 黄连解毒汤干预糖尿病脑病的药效学评价 |
| 4.1 仪器与材料 |
| 4.2 动物 |
| 4.3 实验内容 |
| 4.3.1 分组及处理 |
| 4.3.2 MORRIS水迷宫实验 |
| 4.3.3 尼龙染色和TUNEL染色试验 |
| 4.3.4 脑组织生化指标的测定 |
| 4.3.5 统计方法 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 MORRIS水迷宫实验结果 |
| 4.4.2 NISSL染色和TUNEL染色结果 |
| 4.4.3 小鼠脑组织生化指标 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 黄连解毒汤干预糖尿病脑病的代谢组学研究 |
| 5.0 仪器与材料 |
| 5.1 动物 |
| 5.2 实验内容 |
| 5.2.1 分组及处理 |
| 5.2.2 血浆样品的制备 |
| 5.2.3 色谱条件 |
| 5.2.4 方法学考察 |
| 5.2.5 数据处理及分析 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 方法学验证 |
| 5.3.2 黄连解毒汤对DB/DB小鼠血浆代谢物的影响 |
| 5.3.3 基于OPLS-DA模型中血浆差异代谢物分析 |
| 5.3.4 潜在生物标志物的鉴定 |
| 5.3.5 代谢通路 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）基于微观辨证探讨脑缺血后脾虚病机可能及健脾补土方干预（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 基于文献的缺血性脑卒中证素分布规律研究 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 文献资料来源 |
| 1.2 检索策略 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 筛选方法 |
| 1.6 资料规范化处理 |
| 1.7数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 各证型分布情况 |
| 2.2 病位、病性证素分布规律 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 基于文献的缺血性脑卒中用药规律研究 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 资料规范化处理 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 脑卒中处方中药使用步页次分析 |
| 2.2 脑卒中处方药物类别分析 |
| 2.3 高频使用药物聚类分析 |
| 3 讨论 |
| 第三部分 健脾补土方通过ECM和INT-FAK通路对脑缺血损伤的干预 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 健脾补土方对大鼠脑缺血再灌注模型脑损伤的影响 |
| 1.1.1 健脾补土方对脑缺血再灌注大鼠神经功能和脑组织病理形态的影响 |
| 1.1.2 健脾补土方对脑缺血再灌注大鼠伊文思蓝渗出的影响 |
| 1.1.3 健脾补土方对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡的影响 |
| 1.1.4 健脾补土方对脑缺血再灌注大鼠脑组织ECM的影响 |
| 1.1.5 健脾补土方对调控ECM降解的酶类的影响 |
| 1.1.6 健脾补土方对INT-FAK信号通路INTβ3、p-FAK、p-AKT、bcl-2表达的影响 |
| 1.2 健脾补土方对体外神经元INT、ILK、FAK表达的影响 |
| 2 结果 |
| 2.1 健脾补土方对大鼠脑缺血再灌注模型脑损伤的影响 |
| 2.1.1 动物一般情况及证候观察 |
| 2.1.2 健脾补土方对脑缺血再灌注大鼠神经功能的影响 |
| 2.1.3 健脾补土方对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织病理形态的影响 |
| 2.1.4 健脾补土方对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响 |
| 2.1.5 健脾补土方对脑缺血灌注损伤大鼠神经细胞凋亡的影响 |
| 2.1.6 健脾补土方对脑缺血再灌注大鼠脑组织细胞外基质的影响 |
| 2.1.7 健脾补土方对调控ECM降解的酶类的影响 |
| 2.1.8 健脾补土方对INT-FAK信号通路INTβ3、p-FAK、p-AKT、bcl-2表达的影响 |
| 2.2 健脾补土方对体外神经元INT、ILK、FAK表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 微观辨证 |
| 3.2 取象比类 |
| 3.3 基于微观辨证和取象比类思想的细胞外基质与“脾土”的类比 |
| 3.4 ”脾土”与脑生成的关系 |
| 3.5 “脾土”与脑的经络相通关系 |
| 3.6 “脾土”与脑主情志的关系 |
| 3.7 “脾土”与脑卒中发病的关系 |
| 3.8 脑卒中临床特点与“脾土”的关系 |
| 3.9 ECM和INT-FAK通路与脑缺血损伤的关系 |
| 3.10 中医药防治脑缺血性疾病研究概况 |
| 3.11 健脾补土方通过ECM和INT-FAK通路对脑缺血损伤的干预 |
| 3.12 健脾补土方立法选方理论探讨 |
| 第四部分 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 攻读博士学位期间主要业绩 |
| 综述 中医药防治缺血性脑卒中研究进展 |
| 参考文献 |
四、黄连解毒汤对脑缺血小鼠的抗氧化作用研究（论文参考文献）
- [1]基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究[D]. 姜海伟. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [2]痰热清注射液对脑梗死后apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响[D]. 李中浩. 北京中医药大学, 2021(01)
- [3]OX26/ApoE共修饰载黄连解毒汤介孔二氧化硅纳米载体的构建及药效学评价[D]. 张钰坤. 天津中医药大学, 2021(01)
- [4]中药抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制的研究进展[J]. 于潇,王贵阳,侯宇东,姜艳艳,张薇,刘斌. 中草药, 2021(05)
- [5]黄连解毒汤之“清热解毒”药效与作用机制研究进展[J]. 张婷,宋厚盼,林也,刘乐平,戴宗顺,陈小娟,唐琳,陆晓珊,廖菁,蔡雄,刘中秋. 中华中医药学刊, 2020(11)
- [6]黄连解毒汤含药脑脊液对Aβ1-42致BV2细胞凋亡及炎症反应的机制研究[D]. 彭红梅. 成都中医药大学, 2020(02)
- [7]参麻益智方调控星形胶质细胞改善VaD大鼠认知功能研究[D]. 李泽惠. 中国中医科学院, 2020(01)
- [8]黄连解毒汤体内外化学成分分析及其干预糖尿病脑病的代谢组学研究[D]. 曹东敏. 广东药科大学, 2020(01)
- [9]基于微观辨证探讨脑缺血后脾虚病机可能及健脾补土方干预[D]. 刘旺华. 湖南中医药大学, 2019(04)
- [10]黄连解毒汤抗脑缺血研究进展及展望[J]. 王文杰,陈赛贞,徐红燕,徐煜彬,陈桂荣. 江西中医药, 2018(11)